亚硝酸盐测定新方法从光度法到示波极谱法全 [复制链接]

光度法在亚硝酸盐测定中扮演着至关重要的角色。除了传统的格里斯试剂比色法及其改进版本外，还有许多新兴的方法被报道，例如催化（褪色）光度法、流动注射系统与分光光度法的结合、顺序注射系统与分光光度法的联合应用，以及导数光度法等。这些方法中，分光光度法占据主导地位，它主要包括可见分光光度法、紫外分光光度法和红外分光光度法。

在测定水样中的亚硝酸盐时，我们采用了苯胺-α-萘酚分光光度法。该方法基于苯胺与亚硝酸盐在盐酸介质中发生重氮化反应，随后在NaOH溶液中与α-萘酚偶联，生成桔红色产物。实验显示，该偶联产物的最大吸收波长位于nm处，其线性范围为0～0.96mg／L，且线性相关系数高达0.。此外，其表观摩尔吸收系数为ε=2.×03L·mol-·cm-，而最低检出限为0.08mg/L。这种方法不仅简单、快速，而且选择性好，试剂稳定、毒性相对较小，因此在实际应用中取得了满意的结果。

肉制品中亚硝酸盐的测定常采用格里斯试剂比色法。该方法在最大吸收波长nm处显示出良好的线性关系，相关系数达到0.。我们进一步改进了该方法，例如在测定辣椒酱中的亚硝酸盐时，采用改进的格里斯试剂比色法。在弱酸条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与N--萘基乙二胺偶合，形成紫红色染料。该方法在0～25μg/mL范围内遵循比耳定律，相关系数为0.，检出限为0.5mg/kg，加标回收率达到96.4%～0.7%。这种改进的方法具有高回收率、重现性好和操作简便等优点，特别适合于批量测定。

此外，流动注射系统与分光光度法的结合也广泛应用于食品中硝酸盐或亚硝酸盐的测定。该方法操作简便快捷，显著提高了工作效率，降低了分析人员的劳动强度，非常适合处理大批量的样品。

在酸性环境中，亚硝酸盐会与间苯二酚及锆氧离子发生反应，生成有色螯合物。这一反应机理为肉制品中亚硝酸盐的紫外分光光度法测定提供了理论基础。通过该方法，我们成功建立了简易且快速的食品微量亚硝酸盐测定技术。对猪肉、午餐肉、火腿肠及香肠等样品进行测定，结果显示回收率均高于90%。该方法不仅操作简便、快速且干扰少，还具有良好的选择性，其显色反应产物的稳定性也相当出色，因此非常适合用于肉制品中亚硝酸盐的测定。

此外，导数法与紫外分光光度法的结合进一步拓展了其在硝酸盐和亚硝酸盐分析领域的应用。导数光度法通过对光吸收对波长的导数所形成的光谱进行分析，实现定性或定量目的。高阶导数能有效地分辨重叠光谱，甚至提供“指纹”特征，因此在消除干扰和同时测定各组分方面表现出显著优势。在食品分析中，该方法尤其适用于混合组分含量的测定。

催化（褪色）分光光度法基于亚硝酸根在稀磷酸中催化Evan’sBlue与一氯酸钾的氧化还原反应。同时，在硫酸介质中，亚硝酸根能催化氧化氯酸钾，进而氧化吡啶橙，导致其褪色。利用这一反应，我们建立了微量亚硝酸根的催化光度法，非常适合肉制品中亚硝酸盐的测定，且与国家标准方法相符。该方法不仅适用范围广、无毒、灵敏度高、选择性好，还操作简便，无需复杂设备，有效避免了使用致癌物显色剂的问题。

主要影响因素包括酸度、反应条件、反应时间以及溴酸钾和吡啶的用量等。此外，该方法同样适用于水中痕量亚硝酸盐的测定。

示波极谱法是一种新的电解分析技术，通过测定电解过程中的电流-电压曲线进行定量和定性分析。它具有灵敏度高、适用范围广、检出限低和测量误差小等优点。在测定亚硝酸盐时，样品需经过沉淀蛋白质和去除脂肪的处理，随后在特定条件下与对氨基苯磺酸重氮化，再与8-羟基喹啉偶合形成染料。该染料在汞电极上还原时产生的电流与亚硝酸盐浓度呈线性关系，从而可进行定量分析。

采用单扫描示波极谱法测定香肠中的亚硝酸盐含量，结果显示与分光光度法基本一致，其检测限为3×0-9g/mL。

荧光分析法，作为光谱分析法的一种，其原理在于亚硝酸盐与过量的对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，剩余的对氨基苯磺酸再与荧光胺结合，生成稳定的荧光团及无荧光的水解产物。在特定激发波长nm与荧光波长nm下，该荧光强度与对氨基苯磺酸的量呈正比。通过对氨基苯磺酸原始量与重氮化后剩余量的差异计算，可得出与亚硝酸盐发生重氮化反应的对氨基苯磺酸的量，进而推算出亚硝酸盐的含量。

此方法的优点包括高灵敏度、优选择性、试样用量少，且能有效抵御测液颜色和浑浊的干扰，不受样品稀释度的影响。然而，其操作相对复杂，对环境因素敏感，干扰因素较多，且适用范围有限。

离子色谱法，作为液相色谱法的一种，常用于同时测定多种离子。例如，在苹果汁中同时测定亚硝酸盐、硝酸盐和硫酸盐的含量时，可以采用离子色谱/电导检测法。使用IonPacASll－HC阴离子交换分离柱，以30mg/L氢氧化钾为流动相，配合自动再生抑制型电导检测器ASRS一4mm，该方法展现出良好的线性和重复性，相关系数高达0.，相对偏差控制在3%以内，回收率达到97.0%。