亚硝酸盐检测方法综述
光度法在亚硝酸盐检测中占据着举足轻重的地位。除了传统的格里斯试剂比色法及其改进方法外，近年来还涌现出诸如催化（褪色）光度法、流动注射与分光光度法结合、顺序注射与分光光度法联用以及导数光度法等多种测定技术。这些方法中，分光光度法占据主导地位，其主要包括可见分光光度法、紫外分光光度法和红外分光光度法。
01光度法的主流应用
在测定水样中的亚硝酸盐时，常采用苯胺与a-萘酚的分光光度法。其原理是：苯胺在盐酸介质中与亚硝酸盐发生重氮化反应，随后在NaOH溶液中与a-萘酚结合，生成桔红色的偶联产物。实验结果显示，该偶联产物的最大吸收波长为80nm，线性范围为0～0.96mg/L，线性相关系数高达0.。此外，其表观摩尔吸收系数为ε80=2.×L·mol-1·cm-1，最低检出限为0.08mg/L。该方法不仅操作简便、快速，而且选择性好，试剂稳定、毒性相对较小，因此在实际应用中取得了满意的结果。
?紫外分光光度法在测定肉制品中的亚硝酸盐时，紫外分光光度法是一种简便且快速的方法。当亚硝酸盐在酸性条件下与间苯二酚及锆氧离子反应时，会生成一种有色螯合物，该螯合物在紫外光下具有特征吸收。通过建立这种反应体系，我们能够简易且迅速地测定食品中的微量亚硝酸盐。实际应用中，该方法对猪肉、午餐肉、火腿肠、香肠等样品的亚硝酸盐含量进行了测定，并取得了90%以上的回收率。此外，该方法操作简便、干扰少，具有良好的选择性，且显色反应产物的稳定性高，因此非常适合用于肉制品中亚硝酸盐的测定。
?可见分光光度法在测定水样中的亚硝酸盐时，常采用苯胺与a-萘酚的分光光度法。其原理是：苯胺在盐酸介质中与亚硝酸盐发生重氮化反应，随后在NaOH溶液中与a-萘酚结合，生成桔红色的偶联产物。实验结果显示，该偶联产物的最大吸收波长为80nm，线性范围为0～0.96mg/L，线性相关系数高达0.。此外，其表观摩尔吸收系数为ε80=2.×L·mol-1·cm-1，最低检出限为0.08mg/L。该方法不仅操作简便、快速，而且选择性好，试剂稳定、毒性相对较小，因此在实际应用中取得了满意的结果。
?红外分光光度法虽然不如紫外和可见分光光度法常见，红外分光光度法在某些特定条件下的亚硝酸盐检测中也展现出一定的应用潜力。其优势在于可以提供物质的指纹图谱，有助于复杂样品中的组分分析，但由于亚硝酸盐的特征红外吸收并不显著，因此其应用范围相对有限。
?催化（褪色）光度法催化（褪色）分光光度法是一种基于亚硝酸根在稀磷酸溶液中催化Evan’sBlue一氯酸钾氧化还原反应的测定方法。该方法通过硫酸介质中亚硝酸根催化氧化氯酸钾进而氧化吡啶橙，导致其褪色，从而实现对微量亚硝酸根的催化光度法测定。此方法适用于肉制品中亚硝酸盐的测定，且与国家标准方法相契合。其优点包括适用范围广、无毒、灵敏度高、选择性好，同时操作简便，无需复杂设备，有效避免了现行国家标准中使用致癌物显色剂的不利情况。
此外，催化分光光度法同样适用于水中痕量亚硝酸盐的测定。
?流动注射与分光光度法结合流动注射系统与分光光度法相结合也是一种有效的食品中硝酸盐或亚硝酸盐的测定方法。该方法操作简便快捷，显著提高了工作效率，降低了分析人员的劳动强度，特别适用于大批量的样品分析。
?顺序注射与分光光度法联用顺序注射与分光光度法联用技术在微量检测中表现出色，特别适合高精度、自动化检测要求，适用于环境监测及工业过程控制。
?导数光度法结合导数法，紫外分光光度法的应用范围进一步拓宽，可用于硝酸盐和亚硝酸盐的测定。导数光度法是通过求导光吸收对波长的光谱来进行定性或定量分析的方法。该方法灵敏度高、简单快捷，并且能够显著提高选择性。高阶导数甚至能分辨重叠光谱，提供独特的“指纹”特征，从而有助于消除干扰和进行多组分同时测定。在食品分析中，这种方法尤其适用于混合组分含量的测定。
02具体检测方法及应用
?格里斯试剂比色法及其改进在肉制品中亚硝酸盐含量的测定方面，格里斯试剂比色法是一种常用的方法。该方法选择的最大吸收波长为nm，实验相关系数达到0.，显示出良好的线性关系。为了进一步提高方法的适用性和准确性，科研人员对格里斯试剂比色法进行了改进，如用于辣椒酱中亚硝酸盐含量的测定。改进后的方法在弱酸条件下进行，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与N-1-萘基乙二胺偶合，形成紫红色染料。该染料的最大吸收波长为nm，NO2-含量在0～25μg/mL范围内遵循比耳定律，线性回归方程的相关系数为0.，检出限为0.5mg/kg，加标回收率在96.%～.7%之间。这种改进后的方法具有高回收率、重现性好以及操作简便等特点，非常适合批量测定。
?紫外分光光度法在肉制品中的应用在测定肉制品中的亚硝酸盐时，紫外分光光度法是一种简便且快速的方法。当亚硝酸盐在酸性条件下与间苯二酚及锆氧离子反应时，会生成一种有色螯合物，该螯合物在紫外光下具有特征吸收。通过建立这种反应体系，我们能够简易且迅速地测定食品中的微量亚硝酸盐。实际应用中，该方法对猪肉、午餐肉、火腿肠、香肠等样品的亚硝酸盐含量进行了测定，并取得了90%以上的回收率。此外，该方法操作简便、干扰少，具有良好的选择性，且显色反应产物的稳定性高，因此非常适合用于肉制品中亚硝酸盐的测定。
?催化分光度法催化分光光度法，在测定肉制品中的亚硝酸盐含量时显示出了高效性能，与国家标准方法一致，具有灵敏度高、指示明确的优点。
?流动注射系统一分光光度法流动注射系统与分光光度法结合，因其操作便捷、效率高且成本低，被广泛用于大批量样品的测定。
?导数光度法导数光度法可以有效提高检测的选择性及灵敏度，尤其适用于复杂样品中的多组分含量测定。
?示波极谱法示波极谱法是一种电化学分析方法，通过特殊条件下的电解分析，测定电解过程中得到的电流-电压曲线，从而进行定量和定性分析。该方法具有灵敏度高、适用范围广、检出限低和测量误差小等显著优点。采用单扫描示波极谱法测定香肠中的亚硝酸盐含量，其结果与分光光度法测定结果高度一致，验证了该方法的准确性。此外，该法的检测限可达3×10-9g/mL，显示出其优良的灵敏度。
?荧光分析法荧光分析法，作为光谱分析法的一种，其原理在于亚硝酸盐与过量的对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，剩余的对氨基苯磺酸再与荧光胺结合，生成稳定的荧光团和荧光较弱的水解产物。在特定波长下，该荧光团的强度与对氨基苯磺酸的量直接相关。通过对氨基苯磺酸原始量与重氮化后剩余量的差异，可以计算出与亚硝酸盐发生重氮化反应的对氨基苯磺酸的量，进而推算出亚硝酸盐的含量。该方法优点显著，包括高灵敏度、优选择性、试样用量少，且不受样品颜色和浑浊度的影响。
03其他检测方法
?离子色谱法离子色谱法也是一种常用的亚硝酸盐测定方法。该方法基于液相色谱技术，特别适用于同时测定多种离子，如苹果汁中的亚硝酸盐、硝酸盐和硫酸盐。通过采用特定的离子交换分离柱和流动相，结合电导检测器，该方法展现出良好的线性和重复性，相关系数高达0.，且相对偏差小于3%，回收率达到97.0%。
?紫外分光光度法结合导数法紫外分光光度法结合导数法，进一步拓展了其适用范围，提升了检测的特异性，尤其是在高精度要求的领域表现出色。